Immunohistoquímica d’artèries porcines per a la detecció de la làmina basal endotelial

Abstract

Avui en dia les malalties cardiovasculars són una de les principals causes de mort en els països desenvolupats. Per això, un dels reptes de la bioenginyeria de teixits és aconseguir un implant arterial amb les propietats d’una artèria sana. Una tècnica prometedora dins d’aquest camp és la descel·lularització arterial. El principal repte a superar d’aquet mètode és evitar el risc trombogènic dels implants. És per això que la línia de recerca en Mecanismes de reparació i regeneració de teixits del TR2Lab té com a objectiu analitzar diferents estratègies de descel·lularització que permetin la recel·lularització funcional de l’endoteli evitant el risc trombogènic a partir de la preservació de la làmina basal. Aquest Treball de Fi de Grau ha contribuït a la recerca d’aquesta línia d’investigació. Així doncs, l’objectiu principal d’aquest Treball de Fi de Grau és posar a punt una immunohistoquímica (IHC) amb la finalitat de detectar la laminina present a la cara luminal de la paret arterial. D’aquesta manera poder determinar el grau de preservació de la làmina basal per una reendotelització eficient després del procés de descel·lularització. Per assolir aquest objectiu s’ha treballat a partir de mostres d’artèries caròtides i coronàries incloses en parafina. S’han realitzat tincions histològiques i immunohistoquímiques per estudiar l’estructura arterial general, la presència de nuclis cel·lulars en mostres descel·lularitzades, així com, la presència de laminina en la membrana basal de la túnica íntima. Els resultats obtinguts han obligat a optimitzar els protocols estàndards de preparació de mostres histològiques per tal d’obtenir bones preparacions histològiques. Sobre la decel·lularització s’han aconseguit bons resultats eliminant els nuclis cel·lulars. Pel que fa a la IHC s’ha aplicat el mètode de recuperació d’antigen en el protocol, obtenint així senyal de la laminina, present en la làmina basal. Aquests resultats permetran en estudis posteriors avaluar l’estat de la làmina basal de les artèries descel·lularitzades amb els mitjans que es pot disposar als laboratoris de biociències de la UVIC-UCC.