Estudi pilot d’anàlisi per proteòmica de la composició del plasma ric en plaquetes de pacients amb ferides cròniques

Abstract

Les ferides cròniques cutànies estan augmentant degut a l’envelliment poblacional. La teràpia amb plasma ric en plaquetes (PRP) mostra resultats satisfactoris en ferides de determinades etiologies, però els resultats no són concloents. El PRP activat conté diferents factors de creixement plaquetaris (FC) implicats en el procés de cicatrització. L’objectiu d’aquest projecte és analitzar el perfil proteic del PRP de pacients per conèixer la composició dels preparats de PRP, fet que podria explicar les diferències entre pacients d’efectivitat del PRP per al tractament de ferides. S’han recollit les dades sociodemogràfiques i clíniques de 5 pacients. Mitjançant varis processos de centrifugació a partir de sang dels pacients s’ha obtingut una fracció de PRP de la que s’ha separat un concentrat de plaquetes (PQ) i una fracció de plasma pobre en plaquetes (PPP). Les mostres de PQ s’han activat amb gluconat càlcic, en presència d’heparina, per obtenir els FC. S’ha establert un protocol per a l’anàlisi proteòmic amb espectrometria de masses de les mostres de FC i de PPP. S’ha identificat un perfil proteòmic diferencial entre les mostres de FC i de PPP d’un mateix pacient i entre pacients, amb un major nombre de proteïnes identificades en les mostres de FC. En tots els pacients s’ha identificat un grup de 55 proteïnes que estan implicades en la cicatrització de ferides i que podria justificar l’efectivitat de la teràpia en alguns pacients. Els resultats d’aquest estudi proteòmic pilot serviran de base per continuar un estudi més ampli d’identificació i classificació dels preparats de PRP.

Chronic wounds are increasing due to population aging. Platelet-rich plasma therapy (PRP) shows satisfactory results in wounds of certain etiologies, but the results are not conclusive. Activated PRP contains different platelet growth factors (GF) involved in the wound healing process. The aim of this project is to analyze the protein profile of PRP in patients to know the composition of PRP preparations, which could explain the differences between patients in the effectiveness of PRP for the treatment of wounds. Socio-demographic and clinical data were collected from 5 patients. By different processes of centrifugation from the blood of the patients, a fraction of PRP was obtained from which a platelet concentrate (PQ) and a fraction of platelet-poor plasma (PPP) was separated. PQ samples were activated with calcium gluconate, in the presence of heparin, to obtain GF. A protocol was established for proteomic analysis with mass spectrometry of GF and PPP samples. A differential proteomic profile was identified between GF and PPP samples from the same patient and between patients, with a higher number of proteins identified in GF samples. A group of 55 proteins were identified in all patients that are involved in wound healing process and could justify the effectiveness of therapy in some patients. The results of this pilot proteomic study will serve as a basis for continuing a broader study of identification and classification of PRP preparations.